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鬼笔环肽(phalloidin 鬼笔鹅膏素)
作者:汤姆     来源:伟进生物     发布日期:2017-04-11

                                                                                                        ------------细胞骨架的染色神器

     鬼笔环肽是从毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中得到的有毒环状七肽,它的作用与细胞松弛素B恰好相反,只与聚合的微丝结合,而不与肌动蛋白单体分子结合鬼笔环肽通过与聚合的微丝结合抑制了微丝的解体,破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡FITCRhodamin等荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-actin结合从而显示微丝骨架在细胞中的分布


产品特点:



1)亲和力高Kd= 20 nM

2)特异性强:选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合;

2)优于抗体染色:鬼笔环肽无物种限制,且几乎不存在非特异性染色,染色区和非染色区域对比性极其明显;

4)灵敏度高:纳摩尔浓度(nM)染色即可满足实验要求;

5)兼容性好,肌动蛋白活力不受影响:鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Da,标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持;

6)适用范围广:无物种差异性;同样适用于甲醛固定和打孔处理后的组织样本。


实验流程:

 

鬼笔环肽的配制:


0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇(也可用DMSO或无水乙醇溶解)配成贮存液,可在-20度避光的条件下长期保存,工作液的浓度为5ug/ml,由贮存液加生理盐水PBS稀释20倍即可。


染色程序:


生理盐水PBS清洗细胞2次,每次10分钟;3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;加入5ug/mlFITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间可以短一些,生理盐水PBS清洗细胞2次;DAPIhoechst33258染细胞核10分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;吸去多余水分,加荧光封片液(中性或偏碱性缓冲液加等量甘油),盖上盖玻片,荧光或共聚焦显微镜下观察。


染色结果:


 

 

 

1. 肌动蛋白以及细胞核探针染色的HeLa细胞图。绿色为FITC标记的鬼笔环肽(Cat#:40735ES75, 100 nM);红色伪色代表DAPI染色结果(Cat#: 40727ES10, 2 ng/ml DAPI)。共聚焦显微镜40×物镜观察。

 

2. 肌动蛋白以及细胞核探针染色的HeLa细胞图。红色为TRITC标记的鬼笔环肽(Cat#: 40734ES75, 100 nM);蓝色为DAPI染色结果(Cat#: 40727ES10, 2 ng/ml DAPI)。共聚焦显微镜40×物镜观察。


订购信息:


产品

货号

规格

价格(元)

Amino-Phalloidin 氨基鬼笔环肽

40733ES03

1mg

6399.00

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽


40734ES75



300T



766.00


40734ES80


1mg


6456.00



FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

40735ES75

300T

766.00

40735ES80

1mg

6456.00

iFluor™ 488 phalloidin iFluor™ 488标记鬼笔环肽(绿色)

40736ES75

300T

1689.00

iFluor™ 555 phalloidin iFluor™ 555标记鬼笔环肽(橘色)

40737ES75

300T

1689.00

iFluor™ 647 phalloidin iFluor™ 647标记鬼笔环肽(远红)

40762ES75

300T

1689.00

Phalloidin 鬼笔环肽


40774ES03


1mg


5788.00

40774ES08

5mg


18728.00




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